Stefania Goulioti è nata il 3 novembre 1980 ed è cresciuta a Paleo Faliro. Nel 1998 entra nella Scuola di Geologia dell'Università di Atene, dove studia per due anni. Non è riuscita a laurearsi perché è stata accettata alla Scuola di recitazione del Teatro Nazionale. Si è laureata con lode nel 2004. Ha partecipato a numerose serie televisive, spettacoli teatrali e film.
Oltre a Joy Missing in TV, è stata vista nelle serie Wild Children e Karyotakis.
Il ruolo che l'ha consacrata e che le ha permesso di ottenere i premi Melina Mercouri e Karolos Koun è quello di "Elettra" nell'omonima opera teatrale di Sofocle, messa in scena nel 2007 con la regia di Peter Stein.
Per la sua interpretazione nel film J.A.C.E., diretto da Menelaus Katamagiolis, ha vinto il primo premio per l'interpretazione femminile al Festival del Cinema di Salonicco.
Riguardo al suo ruolo in Maestro in Blue, l'attrice ha dichiarato: "Interpreto Alexandra, una donna di circa 40 anni, che farà il suo ingresso nel serial in un momento in cui le cose hanno preso una svolta e le stravolgerà, portando in superficie elementi del passato della vita di Orestis(Christoforos Papakaliatis). Questa donna è una donna benestante e sicura di sé, che crede di poter avere il controllo di tutto. Ma la vita e la realtà arriveranno a ribaltare questa convinzione. Naturalmente, la sua presenza nella vita degli eroi è molto decisiva".
